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1.
Arq. bras. med. vet. zootec. (Online) ; 70(2): 419-428, mar.-abr. 2018. graf, tab
Article in English | LILACS, VETINDEX | ID: biblio-910397

ABSTRACT

The aim of this study was to evaluate the effect of supplementation with different concentrations of reduced glutathione GSH (0; 5; 7.5; 10mM) in the extender for cryopreservation in dogs with evaluations performed after glycerolization (chilled) and thawing (thawed). For this purpose, we used 8 dogs and two semen collections were performed in a weekly interval, totaling 16 semen samples. The sperm were analyzed by automatic sperm motility (CASA) and flow cytometry analysis of mitochondrial potential (JC1 dye) and membrane/acrosome integrity (FITC-PI dyes). We evaluated subjectively the membrane and acrosome integrity, mitochondrial activity and DNA integrity. Seminal plasma was evaluated for lipid peroxidation (TBARS concentration). Chilled and thawed samples supplemented with 7.5 and 10mM of GSH had lower percentage of sperm with high (DAB - Class I) and medium (DAB - Class II) mitochondrial activity. And 10mM of GSH had higher percentage of low mitochondrial activity (DAB - Class III). Moreover, thawed samples of 10mM of GSH had high DNA fragmentation rates. Probably by a reductive stress effect on mitochondria which lead to an increase in reactive oxygen species, and a mitochondrial malfunction.(AU)


O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da suplementação com diferentes concentrações de glutationa reduzida (GSH - 0; 5; 7,5; 10mM) para criopreservação em cães com avaliações realizadas após glicerolização (refrigeração) e descongelação. Para tal, foram utilizados oito cães e foram realizadas duas coletas de sêmen em intervalo semanal, totalizando 16 amostras de sêmen. Foram avaliadas a motilidade espermática computadorizada (CASA) e a análise de citometria de fluxo do potencial mitocondrial (sonda JC-1) e integridade da membrana/acrossomal (sonda FITC-PI). Subjetivamente foi avaliada a integridade da membrana plasmática e do acrossomal, atividade mitocondrial e integridade do DNA. O plasma seminal foi avaliado quanto à peroxidação lipídica (concentração de TBARS). As amostras refrigeradas e descongeladas suplementadas com 7,5 e 10mM de GSH apresentaram menor porcentagem de espermatozoides com alta atividade mitocondrial (DAB - Classe I) e média (DAB - Classe II). Na concentração de 10mM de GSH, apresentaram maior porcentagem de baixa atividade mitocondrial (DAB - Classe III). Além disso, amostras descongeladas de 10mM de GSH apresentaram taxas de fragmentação de DNA elevadas, provavelmente por efeito de estresse redutivo sobre as mitocôndrias que elevam as espécies reativas de oxigênio e disfunção mitocondrial.(AU)


Subject(s)
Animals , Male , Dogs , Cryopreservation/methods , Glutathione/administration & dosage , Reactive Oxygen Species/administration & dosage , Antioxidants
2.
Rev. bras. ciênc. vet ; 22(2): 114-118, abr.-jun.2015. il.
Article in Portuguese | LILACS | ID: biblio-1008341

ABSTRACT

O presente estudo avaliou se a adição de tocoferol no diluidor para a criopreservação de sêmen bovino reduz os danos causados pelo estresse oxidativo e melhora a capacidade fertilizante do sêmen utilizado na IATF. No primeiro lote sincronizado foram utilizadas 84 fêmeas Nelore (Bostaurusindicus) e no segundo lote 44 fêmeas. Para a inseminação artificial as vacas foram divididas aleatoriamente em dois grupos: controle (inseminadas com sêmen criopreservado sem uso de aditivos) e tocoferol (inseminadas com sêmen criopreservado com adição de 10mmol/mLtocoferol). Foram utilizados sêmen de três reprodutores da raça Nelore (Bos taurus indicus), sendo as doses provenientes de uma única partida, distribuída aleatoriamente entre as fêmeas inseminadas. O diagnóstico de gestação foi realizado 35 dias após a IATF por exame ultrassonográfico retal. O experimento foi realizado em delineamento inteiramente casualizado, e a taxa de prenhez comparada pelo teste qui-quadrado. A adição de 10mmol/mL de tocoferol no diluidor do sêmen não influenciou (P>0,05) na taxa de prenhez após IATF em comparação ao grupo controle (sem aditivos) para as médias do primeiro lote sincronizado (n=84; 38,5% vs 40%), segundo lote sincronizado (n=44; 28% vs 31,6%) e para a média geral dos lotes (n=128; 34,4% vs 37,5%). Nas condições experimentais a adição de 10mmol de tocoferol ao meio crioprotetor do sêmen não melhorou a taxa de prenhez após a inseminação artificial em tempo fixo na espécie bovina.


The present study evaluated if the addition of tocopherol to the extender semen cryopreservation reduces the damage caused by oxidative stress and preserves the fertilizing capacity of semen used in FTAI. In the first lot we used 84 synchronized females Nelore (Bos taurus indicus) and the second lot 44 females.For the artificial insemination the cows were randomly divided into two groups: control (inseminated with semen cryopreserved without using additives) and treatment (inseminated with semen cryopreserved with added 10 mmol/ml tocoferol). We used three semen sires Nelore (Bos taurus indicus), with doses starting from a single, randomly distributed among females inseminated. The pregnancy diagnosis was done 35 days after FTAI by rectal ultrasonography. The experimental design was completely randomized and pregnancy rates compared by chi-square test. There were no effect (P> 0.05) in pregnancy rate using cryopreserved semen with added 10mmol/ml tocopherol in the bovine semen extender compared to the control group (no additives) in the first synchronized group (n = 84, 38.5% vs 40%), in the second synchronized group (n = 44, 28% vs 31.6%) and the all animals (n = 128, 34.4% vs 37.5%). We conclude that, under the experimentalconditions, the addition of 10 mmol of tocopherol in the semen extender did not improve the pregnancy rate after FTAI in the bovine species.


Subject(s)
Cattle , Semen , Insemination, Artificial , Oxidative Stress , Vitamin E , Freezing
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